Análisis nutrigenómico asociado a la vía del retinol y su impacto al tratamiento de cáncer cervicouterino

Abstract

El cáncer cervicouterino en México de acuerdo con el Instituto Nacional de Estadística y Geografía (INEGI) en 2014 ocasionó 3063 defunciones. Sin embargo, si se diagnostica a tiempo puede ser curable. Los factores de riesgo para CaCU son: infección por el virus del papiloma humano (VPH), tener múltiples parejas sexuales, tabaquismo, multiparidad, desnutrición y deficiencia de antioxidantes como el ácido retinoico. El ácido retinoico funciona como ligando del receptor del ácido retinoico (RAR), el cual favorece la transcripción de genes que regulan el ciclo celular. Se ha observado que mecanismos como la metilación y como consecuencia el silenciamiento del gen RAR, juega un papel importante en el establecimiento y progresión del cáncer. Se ha sugerido que la metilación de RAR pudiese ser un cambio temprano en las lesiones intraepiteliales. Así mismo proteínas como el receptor STRA6 han sido reportada por presentar sobreexpresión en cáncer endometrial, ovario, colo-rectal y hepatocarcinoma asociándose en la progresión de los mismos, por lo que fue importante integrar su evaluación con la finalidad de cubrir las moléculas involucradas en la vía del retinol y evaluar su rol dentro de la progresión de la neoplasia. Por tal motivo en el presente estudio se caracterizó las modificaciones epigenéticas de la región promotora de los genes que codifican los receptores del ácido retinoico RAR-α, RAR-β y STRA 6, su expresión en lesiones intraepiteliales y CaCU. Se colectaron 120 muestras de tejido del cérvix a las cuales se les realizó un diagnóstico por citología, quedando divididas en 4 grupos de 30 de acuerdo a la presencia o ausencia de lesión: 1.-sin lesión intraepitelial (SLIE), 2.- con lesión intraepitelial de bajo grado (LIEBG), 3.- con lesión intraepitelial de alto grado (LIEAG) y 4.- con CaCU. La metilación de las regiones promotoras fue evaluada por la técnica de PCR específica de metilación y para la expresión se utilizó PCR en tiempo real (RT-qPCR). En lo referente a la metilación, el gen RAR-α no se asoció con el diagnóstico citológico (p=0.348), sin embargo, en el caso de RAR-β, se observó una asociación estadísticamente significativa entre la hemi-metilación y el diagnóstico citológico (p=0.026). Se encontró que las muestras con LIEBG tiene 3.5 (IC95% 1.2-10.6) veces más de presentar hemi-metilación que las muestras del grupo control (SLIE). De igual manera se realizó un análisis de asociación entre aquellas muestras que presentaron hemi-metilación de ambos genes de manera simultánea y el diagnóstico encontrándose una asociación estadística significativa (p=0.032). En cuanto a la expresión de las isoformas hubo diferencia significativa entre los grupos clasificados por el diagnóstico y la expresión de la isoforma RAR- α2 (p=0.001); sin embargo, para el resto de las isoformas no hubo diferencia. De igual manera en cuanto a la expresión, existe una correlación positiva entre RAR-β2 y RAR-β5 (Rho de Spearman=0.929, p=<0.001); es decir la expresión de las isoformas aumenta de igual manera y al mismo tiempo. Para el caso de STRA6 se encontró expresión de transcritos en todos los grupos (SLIE, LIEBG, LIEAG, CaCu), sin embargo, no hubo diferencias asociadas a la lesión o CaCu (p=0.754). Por otro lado, se llevó a cabo un análisis de correlación entre el retinol sérico de las pacientes y la expresión del gen STRA6, y se observó que no existe correlación independiente del grado de lesión. En los resultados de IHQ se encontró que el 89.6% de las muestras mostró expresión proteica de STRA6, con una localización celular citoplasmática/nuclear frecuente en todos los grupos, con esto se infiere que la función y localización de la proteína en tejido de cérvix difiere a la conocida en otros tejidos, independientemente del grado de lesión o CaCu. Por último, no se encontró una asociación entre la expresión génica y proteica, la diferencia entre ambas expresiones se podría explicar por procesos en el control traduccional y post-traduccional que modifican la configuración de la proteína.